一、操作规程: 1灌胶
a、取出灌胶模具,打开封底盘**完全开放的状态,松开两侧螺丝,向外侧打开夹子。
b、取长方形和带凹槽的长玻板各一块,从内到外依次按带凹槽玻板及长方形玻板的顺序排列,形成gel sandwich。注意正确排列以防漏胶。
c、短玻板朝外将sandwich放入模具中,检测sandwich的底是否紧靠底面。旋紧螺丝。将封底盘锁**密闭状态。
d、将模具放在桌面上准备灌胶。 e、根据需要配制一定浓度的胶。
2分离胶的灌制:用加样枪慢慢将胶加入sandwich中,注意不要有气泡。其上加0.1%SDS封顶.
3浓缩胶的灌制:待分离胶凝后弃去SDS,开始灌浓缩胶,**后轻轻插入梳子。
f、待胶聚合后,拔出梳子,用电泳缓冲液清洗加样槽,去除未聚合的胶。 g、模具放入电泳槽中。 4电泳
a、加适量的电泳缓冲液 b、准备样品,加样。
c、盖上电泳槽的盖子,注意红色对正极,黑色对负极。打开电源,开始电泳。初始电压100V, 15分钟后改为120v。
d、直**指示剂距前沿1cm处结束电泳,拔掉电源,小心取出胶,根据需要进行染色或转膜,回收电泳缓冲液(可重复利用3次)。 二、注意事项:
a、每次用完后,立即清洗电泳槽,灌胶模具,玻璃板(先用自来水洗干净,再用蒸馏水冲一遍后放在架子上晾干)。
b、扣紧或打开灌胶模具时要用力均匀,以免压坏玻璃板。 c、盖上电泳槽的盖子时,务必注意正负极不要接反。