一.意图
为规范Bio-rad小
电泳槽及
电泳仪的根本操作、保护养护、反常处理程序,避免人为操作失误,保证Bio-rad小
电泳槽及
电泳仪正常工作,特制定本程序。
二.适用范围
三.职责
1. 本程序的实施者为Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者,各实验室担任人对本程序的实施状况进行监督。
2. 平时运行及保护、定时保护、定时点检及养护由Bio-rad小电泳槽及电泳仪操作者担任。
四.内容
1.灌胶
a、取出灌胶模具,翻开封底盘**彻底敞开的状况,松开两侧螺丝,向外侧翻开夹子。
b、取长方形和带凹槽的长玻板各一块,从内到外顺次按带凹槽玻板及长方形玻板的顺序排列,构成gel sandwich。留意准确排列以防漏胶。
c、短玻板朝外将sandwich放入模具中,检查sandwich的底是不是紧靠底面。旋紧螺丝。将封底盘锁**密闭状况。
d、将模具放在桌面上预备灌胶。 e、根据需要制造一定浓度的胶。
1、别离胶的灌制:用加样枪渐渐将胶参加sandwich中,留意不要有气泡。其上加0.1%SDS封顶.
2、浓缩胶的灌制:待别离胶凝后弃去SDS,开端灌浓缩胶,**终悄悄刺进梳子。
f、待胶聚合后,拔出梳子,用电泳缓冲液清洁加样槽,去掉未聚合的胶。 g、模具放入电泳槽中。
2.电泳
a、加适当的电泳缓冲液 b、预备样品,加样。
c、盖上电泳槽的盖子,留意赤色对正极,黑色对负极。翻开电源,开端电泳。初始电压100V, 15分钟后改为120v。
d、直**指示剂距前沿1cm处完毕电泳,拔掉电源,当心取出胶,根据需要进行染色或转膜,回收电泳缓冲液(可重复使用3次)。
五.留意事项:
a、每次用完后,当即清洁电泳槽,灌胶模具,玻璃板(先用自来水洗洁净,再用蒸馏水冲一遍后放在架子上晒干)。
b、扣紧或翻开灌胶模具时要用力均匀,以免压坏玻璃板。 c、盖上电泳槽的盖子时,必须留意正负极不要接反。